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自身免疫性腦脊髓炎(EAE)小鼠模型一、實(shí)驗(yàn)材料 MOG35-55(吉爾生物,51716) CFA(sigma,F5881) 百日咳素(sigma,P7208) 二、實(shí)驗(yàn)方法 1、抗原乳化:1mg/ml的CFA和1mg/ml的MOG35-55混合乳化,利用三通管排出注射器中的空氣,冰上來回交替推動(dòng)活塞 30 min,抗原呈完全乳化狀態(tài)。 (也可使用高速攪拌器,4℃攪拌2min,3-5次) 2、完全乳化的抗原使用1 ml注射器分裝,排除內(nèi)空氣后保存于冰上。 3、百日咳素(PTX)的稀釋:用 1×PBS以 1:25稀釋 PTX至終濃度2ug/ml。 4、小鼠尾靜脈(i.v.)注射PTX,100ul/只小鼠 。 5、小鼠氣麻后,用酒精棉球消毒小鼠前肢肩胛骨與后扇部位的皮膚,皮下注射 MOG35-55抗原乳化液于該四點(diǎn)處,每處 50μl。 7、48 h后,每只小鼠再次尾靜脈注射 100 μl PTX。 8、模型誘導(dǎo)首天記為Day 0,每天統(tǒng)計(jì)小鼠體重,觀察評(píng)分 。 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn):
三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
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