透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope,TEM)是使用最為廣泛的一類電鏡。通過發(fā)射電子束從而穿過超薄的樣品,同時(shí)與樣本相互作用,既而形成圖像。透射電鏡具有分辨率高和放大倍數(shù)高的優(yōu)點(diǎn)。其分辨率為0.1-0.2nm,放大倍數(shù)為幾萬到幾十萬倍。目前透射電鏡已經(jīng)廣泛的應(yīng)用到癌癥研究,病毒學(xué)研究,微生物學(xué),細(xì)胞學(xué)研究等生物領(lǐng)域。
透射電鏡是以電子束透過樣品經(jīng)過聚焦與放大后所產(chǎn)生的物像,投射到熒光屏上或照相底片上進(jìn)行觀察。電子與樣品中的原子碰撞而改變方向,從而產(chǎn)生立體角散射。散射角的大小與樣品的密度、厚度相關(guān),因此可以形成明暗不同的影像。由于電子易散射或被物體吸收,故穿透力低,必須制備超薄切片(通常為50-100 nm)。要在機(jī)體死亡后的數(shù)分鐘內(nèi)取材,組織塊要小(1mm3以內(nèi)),常用戊二醛和鋨酸雙重固定,包埋介質(zhì)包埋,用超薄切片機(jī)切成薄片,再經(jīng)醋酸鈾和檸檬酸鉛等進(jìn)行電子染色。